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更新時間:2020-06-30
簡要描述:
口蹄疫O型正向間接血凝抗體檢測試劑盒判定方法和標準:先觀察陰性血清對照好和稀釋液對照孔,紅血球應全部沉入孔底,無凝集現(xiàn)象(-)或呈陽性(+)的輕度凝集為合格;陽性血清對照應呈(+++)凝集為合格。在以上3孔對照合格的情況下,觀察待檢血清各孔的凝集程度,以呈“++"凝集的待檢血清*稀釋度
口蹄疫O型正向間接血凝抗體檢測試劑盒
一、 試驗材料
1、 6孔110°微量血凝板。
2、 10-100微升可調微量移液器
3、 塑料咀
4、 口蹄疫O型正向間接血凝抗原(口蹄疫O型正向血凝診斷液),每瓶5毫升,可檢測血清25-30頭份。
5、 陽性對照血清,每瓶0.5毫升;陰性對照血清每瓶0.5毫升
6、 稀釋液每瓶50毫升
7、 待檢血清每份0.2-0.5毫升(56℃水浴滅活30分鐘)
二、 操作步驟
1、 檢測前,應將試劑盒從冰箱中拿出回溫到室溫,并且將抗原液搖勻。
2、 稀釋待檢血清:在血凝板上的頭一個孔――第六孔各加稀釋液50ul,待檢血清加入第1孔,混勻后從中取出50ul加入第二孔,依此類推直至第六孔混勻后丟棄50ul,從第1孔――第六孔的血清稀釋度依次為1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64。
3、 稀釋陰性血清和陽性血清:在血凝板上的*1排*孔加稀釋液50ul,取陰性血清50ul混勻
后取出50ul丟棄。此孔即為陰性血清對照孔。
在血凝板上的*2排*孔加稀釋液50ul,第2孔――第7孔各加稀釋液50ul 。吸取陽性血清50ul,加入*孔混勻并從中取出50ul加入第2孔……直到第7孔混勻并丟棄50ul。第七孔的陽性血清稀釋度則為1:512,口蹄疫O型正向間接血凝抗體檢測試劑盒。
4、 在血凝板上的*排第8孔加稀釋液50ul即為稀釋液對照孔。
5、 滴加抗原:*排1-8孔和對照孔各加血凝抗原25ul立即置微量震蕩器上震蕩1分鐘,或用手
搖勻。室溫下靜置2-3小時后判斷結果,也可于次日判斷結果。
口蹄疫O型正向間接血凝抗體檢測試劑盒
6、 判定方法和標準:先觀察陰性血清對照好和稀釋液對照孔,紅血球應全部沉入孔底,無凝集現(xiàn)象(-)或呈陽性(+)的輕度凝集為合格;陽性血清對照應呈(+++)凝集為合格。
在以上3孔對照合格的情況下,觀察待檢血清各孔的凝集程度,以呈“++”凝集的待檢血清*稀釋度
為血凝效價(血凝價)。血清的血凝價達到1:16為免疫合格。
“-”表示紅血球100%沉于孔底,*不凝集
“+”表示約有25%的紅血球發(fā)生凝集
“++”表示50%紅血球出現(xiàn)凝集
“+++”表示75%紅血球凝集
“++++”表示90-100%紅血球凝集
7、 注意事項
(1) 勿用90°或130°血凝板,以免誤判。
(2) 污染嚴重或溶血嚴重的血清樣品不宜檢測。
(3) 凍干血凝抗原,必須加稀釋液浸泡7-10天,方可使用,否則易發(fā)生自凝現(xiàn)象。
(4) 用過的血凝板,應及時沖洗干凈,勿用毛刷或其它硬物刷洗板孔,以免影響孔內光潔度。
(5) 使用血凝抗原時,必須充分搖勻,瓶底應無血球沉積。
(6) 液體血凝抗原4-8℃貯存,有效期4個月。
(7) 如來不及判定結果或靜置2小時結果不清晰,也可放置第二天判定。
(8) 每次檢測,只設陰性、陽性血清和稀釋液對照各1孔。
(9) 稀釋不同的試驗要素時,必須更換塑料咀。
(10) 血凝板洗凈后,自然干燥,可重復使用。
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