人用ELISA試劑盒是利用酶聯(lián)免疫吸附測定法用于食品及飼料中三聚氰胺的定量測定。檢測原理:酶聯(lián)免疫吸附測定法定量測定三聚氰胺殘留。利用萃取液通過均質(zhì)及振蕩的方式提取樣品中的三聚氰胺進行免疫測定。先將三聚氰胺酶標(biāo)記物,樣品萃取物及標(biāo)準加入到已經(jīng)包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始反應(yīng)。
在人用ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反響的完結(jié)需求有一定的溫度,這一保溫進程稱為溫育,有人稱之為孵育,在本產(chǎn)品中似不恰當(dāng)。
保溫的方法除有的附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將其置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰,板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱,本產(chǎn)品應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,終將ELISA板放在濕紗布上。
濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度,特別是在氣溫較低的時分更應(yīng)如此。無論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響,操作時的室溫應(yīng)嚴厲限制在規(guī)則的范圍內(nèi),規(guī)范室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求操控溫育。
室溫溫育時,人用ELISA試劑盒只需平置于操作臺上即可。應(yīng)留意溫育的溫度和時刻應(yīng)按規(guī)則力求準確。為確保這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板一起測定。
一般來講,抗原和捕獲抗體、檢測抗體之間的結(jié)合作用很強,樣品濃度被稀釋并不影響它們的結(jié)合,而造成基質(zhì)效應(yīng)的非特異結(jié)合的力要弱很多,如果不斷稀釋樣品,非特異結(jié)合造成的干擾會逐步減少,測量值也更接近真實值。沒有基質(zhì)效應(yīng)時,無論如何稀釋,測量值都和真實值吻合。而有基質(zhì)效應(yīng)時,稀釋會造成非特異性結(jié)合比例的減少,測量值也相應(yīng)地產(chǎn)生很大改變。