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安全試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反響的完結(jié)需求有一定的溫度,這一保溫進(jìn)程稱為溫育,有人稱之為孵育,在本產(chǎn)品中似不恰當(dāng)。
保溫的方法除有的附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將其置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰,板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱,本產(chǎn)品應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,終將ELISA板放在濕紗布上。
濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)分更應(yīng)如此。無論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響,操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)厲限制在規(guī)則的范圍內(nèi),規(guī)范室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時(shí)可根據(jù)說明書的要求操控溫育。
安全試劑盒使用方法:
1.樣品稀釋:酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽性。因此,國外檢測(cè)血清抗體的試劑盒,均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù),以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。但是,有些用戶未能嚴(yán)格按使用說明書操作,如產(chǎn)品應(yīng)取10u1樣品進(jìn)行稀釋,個(gè)別用戶取5u1甚至1u1樣品進(jìn)行稀釋,由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠,因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確,檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)問題。
2.試劑盒平衡:試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠,樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒打開盒蓋置37℃溫箱20分鐘。稀釋前、后的樣品需要充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性。
3.加樣:盡量操作規(guī)范,將液體垂直懸空快速加入到微孔板中,避免加到孔避上。加完試劑后用手適當(dāng)振蕩或在桌面適當(dāng)作圓周運(yùn)動(dòng),使孔內(nèi)試劑充分混勻,蓋好蓋板膜。
4.洗板:洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置10-15s,甩去板孔中洗液后,一定要用力拍干;及時(shí)更換吸水紙,尤其是拍過酶標(biāo)記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗(yàn)結(jié)果。